[所属分类:技术资料] [发布时间:2019-12-16] [发布人:] [阅读次数:] [返回]

山东拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd　

沉降碟暴露时间验证方案

一、验证方案起草、审批                                             

1、验证方案起草

验证项目	沉降碟暴露时间验证
使用部门	中心检验室	验证方案编号		YZ-13580-1
起草部门	中心检验室
起草人签名
日 期

2、验证方案会审

审核人
日 期

3、验证方案批准

批准人	验证委员会主任
签名
日 期

 

二、验证报告起草审查及会审

1、验证报告起草

验证项目	沉降碟暴露时间验证
使用部门	中心化验室	验证报告编号
起草部门	中心化验室
起草人签名
日 期

2、验证报告会审

审核人
日 期

 

三、验证证书的批准

验证项目	沉降碟暴露时间验证
使用部门	中心化验室	验证证书编号
批准人	验证委员会主任
签名
日 期

 

四、引言

1、验证目的：验证我公司沉降碟的暴露时间为4小时，依据《中国药典》2010年版附录无菌检查法和微生物限度检查法下灵敏度检查项进行验证，以证明沉降碟中培养基在空气暴露时间可以达到4小时。

2、概述：我公司沉降碟为普通的培养皿（φ90mm×15mm），所采用的培养基为大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），每个培养皿含培养基20ml，根据培养基特性制订检验方法，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。

3、验证组织

组长：

组员：

五、菌种及培养基

1、菌种

金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】、铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】、枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】、生孢梭菌【CMCC（B）64941】、白色念珠菌【CMCC（F）98001】。

2、培养基

营养肉汤培养基、改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基

3、无菌检验仪器及相关设备

   无菌室、净化工作台、恒温培养箱（30～35℃）、生化培养箱（23～28℃）、高压蒸汽灭菌器、电子天平、电冰箱、电热干燥箱、玻璃器皿。

六、菌液制备

接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中培养18～24小时；接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养24～48小时；上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。

七、验证方法

1、取配制好的沉降碟32个，同时灭菌后，取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。

2、把灭菌后的沉降碟16个放置在无菌检查时的超净洁净台上暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。

八、回收率计算

供试品组各的菌回收率（%）=×100%

九、结果判断

1、暴露前试验组的菌回收率应不低于70%。暴露4小时后试验组的菌回收率应不低于70%。

2、若暴露前试验组的菌回收率应不低于70%，说明加入的培养基能满足微生物生长，若暴露后试验组的菌回收率应不低于70%，说明培养皿暴露4小时后，培养基仍能满足微生物生长，

3、若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，应采用增加培养基，降低暴露时间，并重新进行方法验证，使试验组菌回收率大于70%。

十、验证结果和记录（附后）

十一、验证报告（附后）

十二、验证证书（附后）

沉降碟暴露时间验证报告

                                           编号：

20   年  月  日至20   年  月  日，验证小组根据批准的 “YZ-13580-1号”验证方案，对沉降碟的暴露时间进行验证，结果试验组的菌回收率均符合规定。

通过验证，证明沉降碟的暴露时间可以达到4小时。

验证小组：

                                     20   年   月   日

沉降碟暴露时间验证合格证书

                          编号：

    经审核，“xxx”验证方案合理，验证结果符合规定要求，特此发给验证合格证书，沉降碟的暴露时间可以达到4小时。

 

 

 

                                 XX药业股份有限公司

                                         验证委员会（盖章）

20   年   月   日

 

沉降碟暴露时间验证记录

 

细菌数、霉菌和酵母菌数

检品名称	沉降碟
配制部门	中心检验室
检验依据	《中国药典》2010年版附录
检验日期：	20   年   月   日		报告日期			20   年   月   日
验证方法	取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天。
菌种名称	菌种代数	验证加菌数（cfu）		样品本底菌数	试验组（样品+验证加菌数）		回收率（%）
金黄色葡萄球菌1
金黄色葡萄球菌2
金黄色葡萄球菌3
铜绿假单胞菌1
铜绿假单胞菌2
铜绿假单胞菌3
枯草芽孢杆菌1
枯草芽孢杆菌2
枯草芽孢杆菌3
生孢梭菌1
生孢梭菌2
生孢梭菌3
白色念珠菌1
白色念珠菌2
白色念珠菌3

供试品组各的菌回收率（%）=×100%

                                                                                     

检验人： 复核人：

沉降碟暴露时间验证记录

 

细菌数、霉菌和酵母菌数

检品名称	沉降碟
配制部门	中心检验室
检验依据	《中国药典》2010年版附录
检验日期：	20   年   月   日		报告日期			20   年   月   日
验证方法	取16个沉降碟，暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天。
菌种名称	菌种代数	验证加菌数（cfu）		样品本底菌数	试验组（样品+验证加菌数）		回收率（%）
金黄色葡萄球菌1
金黄色葡萄球菌2
金黄色葡萄球菌3
铜绿假单胞菌1
铜绿假单胞菌2
铜绿假单胞菌3
枯草芽孢杆菌1
枯草芽孢杆菌2
枯草芽孢杆菌3
生孢梭菌1
生孢梭菌2
生孢梭菌3
白色念珠菌1
白色念珠菌2
白色念珠菌3

供试品组各的菌回收率（%）=×100%

                                                                                     

检验人： 复核人：