编号：
批号：

技术资料

您现在的位置：网站首页 >> 技术资料

培养基适用性检查方案——甘露醇氯化钠琼脂培养基

[所属分类:技术资料] [发布时间:2018-5-21] [发布人:管理员] [阅读次数:] [返回]

山东拓普生物工程有限公司

Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd

说明：本文仅提供检查方法，如需生成文件，请自行补充其他所需项目

培养基适用性检查方案——甘露醇氯化钠琼脂培养基

【培养基原理】

胰酪胨、动物组织胃蛋白酶水解物、牛肉进浸出粉提供微生物生长所需的氮源；D-甘露醇提供选择性碳源；高浓度氯化钠产生的高渗透压可抑制大肠埃希氏菌等部分不耐盐细菌的生长；；酚红为酸碱指示剂，酸性变黄，碱性变红；琼脂为凝固剂。

【所需菌种】

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)[CMCC(B)44102]

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [CMCC(B)26003]

【检查项目】

促生长能力、指示能力、抑制能力

【检查方法】

平皿涂布法，同步使用对照培养基与待检培养基

【菌液制备与稀释】

挑取四代以内（含四代）上述菌种的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24h，使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每0.1ml含小于100cfu的菌悬液(稀释梯度：通常情况下为10^-6)。大肠埃希氏菌稀释成每0.1ml含不少于100cfu的菌悬液(稀释梯度：通常情况下为10^-5)

【培养基制备】

被检培养基：称取培养基22.2g于200ml纯化水中,121℃灭菌15分钟，冷至50℃左右倾注平板(每皿20ml左右)

对照培养基：按照说明书中的比例称取，其它步骤同上。

将制备好的平板做好标记，条件允许的话置于30～35℃培养箱中预置约2～4h，目的是消除琼脂表面多余的水分，以便涂布操作。

【实验方法】

1. 培养基阳性组：

取稀释后的菌悬液0.1ml加于预制的平板中，涂布均匀（涂布操作注意避免菌液过多的存在于平皿边缘，当涂布过程感觉平板表面比较干燥时即认为涂布完成），做2个平行对照。

2. 培养基阴性组：待检培养基与对照培养基，同时各做一个空白对照，即不添加菌液。

3. 对照培养基与被检培养基接种方法均按照上述说明操作，同时在平皿底部做好分类标记。

4. 置30～35℃培养箱中培养18～72h。

5. 计数并观察菌落特征。

【计算方法】

回收率/生长率＝（被检培养基阳性组平均菌落数—被检培养基阴性组平均菌落数）/（对照培养基阳性组平均菌落数—对照培养基阴性组平均菌落数）×100%。

【判定依据】

若生长率在0.5～2.0，且菌落形态大小应与对照培养基一致，则判定合格。

培养基适用性检查记录

培养基名称

甘露醇氯化钠琼脂培养基

批号

20151029

培养基编号

M3423B

包装规格

250g/瓶

供货单位

山东拓普生物工程有限公司

检查日期

2015年11月02日

对照培养基批号

201510

报告日期

2015年11月04日

对照培养基来源

中国食品药品检定研究院

检验依据

中国药典2015版

检验操作程序：***********************************

培养条件

温度：30-35℃ 时间：48h

试验菌

代数

稀释级

计数培养基

cfu/皿

被检培养基

cfu/皿

对照培养基

生长率

抑制能力检查

大肠埃希氏菌

CMCC(B)44102

计数

10^-7

空白

均值

910

试管

10^-6

未生长

空白

未生长

空白

未生长

未

生

长

未生长

未

生

长

促生长能力与指示能力检查

金黄色葡萄球菌

CMCC(B)26003

10^-7

均值

0.97

黄色菌落

结论

被检培养基适用性检查 合格 不合格

(注：空白有细菌生长，则本次检查无效)

检查人

******

日期

2015年11月04日

复核人

******

日期

2015年11月04日

在线客服

培养基适用性检查方案——甘露醇氯化钠琼脂培养基